CARdiac Mesenchymal Extracellular Vesicles (CARMEV) for prevention of ischemic heart failure

Syfte och mål

Vi har lyckats skapa en GMP-adapterad produktion av extracellulär vesiklar (EVs) från både "human prenatal cardiac mesenchymal stromal cells" (hpcMSCs) och benmärgs-MSCs (BM-MSCs), vilka har karakteriserats och utvärderats för deras effekt att förhindra hjärtsvikt efter en hjärtinfarkt i musmodell. EVs från BM-MSCs, odlade enligt vårt protokoll är mest effektiva att förhindra ärrbildning och hjärtsviktsutveckling. Mekanismen bakom deras effekt är kartlagd. Vi kallar produkten CARMEV 2.0, och den genomgår nu slutgiltiga optimeringssteg inför ansökan om fas 1 studie.

Resultat och förväntade effekter

-EVs från hpcMSCs kan reproducerbart produceras från primära celler -EVs från hpcMSCs är i storleksordningen 150 nm, och uttrycker samtliga markörer för EVs samt delar av MSC-markörerna - Aktivering av hpcMSCs med TNF-alfa ökar inte effektiviteten - Effekten på hjärtremodulering efter ischemi-reperfusionsskada i musmodell är begränsad. Däremot: - EVs från BM-MSCs odlade enligt vårt GMP-adapterade protokoll (CARMEV 2.0), är i storleken 80 nm och förhindrar effektivt hjärtsviktsutveckling efter hjärtinfarkt genom immunmodulering och extracellulär matrix produktion

Upplägg och genomförande

1) Optimering av odlingsprotokoll: GMP-anpassat- möjliggör storskalig produktion. 2) Karakterisering av EVs med FACS 3) Nano Particle Tracking karakterisering 4) In vitro test: MLR och angiogenes test 5) Ischemi-reperfusionsmodell i mus. Ockluderar LAD (initialt 30 min, sedan 40 min), varefter standarddos (100 miljarder EVs) injiceras intramyokardiellt. Injektion och echo analyser är dubbelblindade. 6) Extracellulär matrix analyseras med proteomics. 7) Det här upplägget möjliggjorde jämförelse mellan EVs från hpcMSCs och BM-MSCs, varvid CARMEV 2.0 kunde utvecklas.